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ou utilise-t-elle une autre voie? Elle permet de connaître la voie de dégradation du glucose c'est-à-dire son type métabolique. Principe Le métabolisme des bactéries est recherché dans les ressources de Hugh & Leifson auxquelles on ajoute du glucose. Régénération du milieu (le milieu a été stocké trop froid pour le gaz dissous dans le milieu puisse s'en échapper). Par conséquent, il présente un gradient de concentration en oxygène (la teneur en oxygène en surface est supérieure à la teneur en oxygène en profondeur). RECHERCHE DE LA VOIE D ATTAQUE DU GLUCOSE : définition de RECHERCHE DE LA VOIE D ATTAQUE DU GLUCOSE et synonymes de RECHERCHE DE LA VOIE D ATTAQUE DU GLUCOSE (français). Les bactéries qui utilisent le glucose produisent de l'acide. Le produit acide est décrit par le changement de couleur du bleu de bromothymol, qui est un indicateur de couleur du pH contenu dans le milieu. A la fin de l'incubation, on observe le changement de couleur du milieu pour déterminer le typer d'oxyde ou de fermentation. La composition du milieu Hugh & Leifson - Tryptone (2g) - Bleu de bromothymol (30mg) - Chlorure de sodium (5g) - Hydrogénophosphate de potassium (0, 3g) - Agar-agar (2, 5g) Mode opératoire Nous utilisons une culture propre pour éviter des résultats déformés.

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L'utilisation du glucose se traduit par une acidification du milieu révélée par le virage du bleu de bromothymol à sa teinte acide (jaune). - l'étape de régénération qui permet de créer un gradient de dioxygène. Technique d'ensemencement Régénérer le tube 20 minutes à 100°C Additionner stérilement le glucose pour une concentration finale de 1% Solidifier le milieu en le plaçant dans un bain d'eau froide Ensemencer par une piqûre centrale à l'aide du fil droit. Voie d attaque du glucose d. Incuber 24h à 37°C, bouchon dévissé. Lecture et Interprétation M. G - Tube 1: peu ou pas de culture (pas d'utilisation du glucose) absence d'acidification: Métabolisme inerte. - Tube 2:pour le tube avec paraffine il y a peu ou pas de culture et une absence d'acidification. Dans le tube sans paraffine, il y a une acidification modéré, généralement le haut du tube est jaune et le reste est vert: Métabolisme oxydatif. - Tube 3:les deux tubes sont jaunes, acidification dans les deux tubes: Métabolisme fermentatif et oxydatif du glucose.

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Cette technique permet la détermination du métabolisme oxydation ou fermentatif de la bactérie, autrement dit: dégrade-t-elle le glucose via le cycle de Krebs ou utilise-t-elle une autre voie? Principe [ modifier | modifier le code] Dans le milieu Hugh et Leifson auquel on ajoute du glucose, on cherche le métabolisme de la bactérie. Le milieu est régénéré (il a été maintenu en surfusion pour que les gaz dissous dans le milieu s'en échappent). Il possède donc un gradient de concentration en dioxygène (l'O 2 est plus abondant en surface qu'en profondeur). Les bactéries qui utilisent le glucose produisent des acides. La visualisation des productions d'acide est indiquée par le changement de couleur du bleu de bromothymol, indicateur coloré de pH contenu dans le milieu. Voie d attaque du glucose pour. À la fin de l'incubation, on observe le changement de couleur du milieu pour déterminer le type oxydatif ou fermentatif. Composition du milieu de Hugh et Leifson [ modifier | modifier le code]:→voir Hugh et Leifson Attention: c'est après la régénération qu'il faut ajouter une solution de glucose à 10.

[ modifier] Composition du milieu de Hugh et Leifson:→voir Hugh et Leifson Attention: c'est après la régénération qu'il faut ajouter une solution de glucose à 10%. Autrement, elle pourrait se caraméliser. [ modifier] Technique On utilise une culture pure pour ne pas avoir de résultats faussés. On utilise deux milieux coulés en tube: la surface du premier est exposée à l'air (Tube O) tandis que l'autre est isolé de l'air avec de la paraffine liquide (Tube F). Régénération à 100 °C pendant 30 minutes. On ajoute la solution de glucose à 10% dans les tubes contenant la gélose surfusion (10 gouttes environ) à l'aide d'une pipette pasteur. On ensemence les tubes avec une pipette pasteur boutonée ou avec une anse. On ajoute de la paraffine dans le tube F, sur une hauteur de 1 cm environ. Recherche de la voie d'attaque du glucose — Wikipédia. Incubation à 37 °C pendant 24 à 48 h. [ modifier] Lecture Résultats possibles ( O: Ouvert - F: Fermé) 1 Tubes tel qu'ils doivent être après ensemencement 2 Haut du Tube O jaune → il y a eu un changement de couleur du à l'acidification dans le haut du tube O uniquement: les bactéries ont besoin d'oxygène pour dégrader le glucose.

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