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Wednesday, 17 July 2024

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Placer ladite portion dans des flacons contenant 225 ml d'eau peptonée. Mélangez et homogénéisez l'échantillon. Si la charge microbienne est suspectée d'être élevée, des dilutions en série ou décimales peuvent être effectuées pour faciliter le comptage des unités formant colonie (UFC). Le nombre de dilutions dépendra du type d'échantillon et de l'expérience de l'analyste. Si, en revanche, la charge microbienne est suspectée d'être très faible, aucune dilution n'est nécessaire. Par la suite, sous-culture sur des milieux sélectifs. Dans le cas des aliments de la mer, tels que les crustacés, les poissons, entre autres, à la recherche de Vibrio cholerae ou d'autres espèces de Vibrio, de l'eau peptonée ajustée à pH 8, 5 (eau peptonée alcaline) doit être utilisée. Contrôle de qualité A partir de chaque lot préparé, un à deux tubes doivent être incubés sans inoculation pendant 24 heures en aérobiose à 37 ° C. À la fin du temps, aucune turbidité ou changement de couleur ne doit être observé. Des souches témoins connues peuvent également être utilisées pour évaluer leur efficacité: Les souches bactériennes suivantes peuvent être utilisées pour cela: Escherichia coli ATCC 25922, Escherichia coli ATCC 8927, Staphylococcus aureus ATCC 6538, Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027, Salmonella typhimurium ATCC 1428, Salmonella enteritidis ATCC 13076.

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Le pH final est de 7, 0 ± 0, 2. Pour sa préparation, peser 20 g de milieu déshydraté et dissoudre dans 1 litre d'eau distillée. Laissez reposer environ 5 minutes. Chauffer 1 minute jusqu'à dissolution complète. Verser dans des bocaux appropriés au besoin. Stériliser à l'autoclave à 121 ° C pendant 15 minutes. -Eau peptonée alcaline Peser 25 g de milieu déshydraté et dissoudre dans 1 litre d'eau. Procédez comme décrit ci-dessus. Le pH varie de 8, 3 à 8, 7. Utilisation L'inoculum se fait en plaçant l'échantillon directement. Il est utilisé pour diluer des échantillons, en particulier lorsque l'on soupçonne la présence de bactéries endommagées. Habituellement, les dilutions sont de 1:10 et 1: 100. Incuber pendant 24 heures en aérobiose à 35-37 ° C. Échantillons de selles Pour les échantillons de selles pour Salmonella, l'utilisation d'eau tamponnée ou tamponnée est recommandée comme milieu de pré-enrichissement. Pour ce faire, procédez comme suit: Si les selles se forment, prélevez 1 g d'échantillon.

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eau peptonée alcaline milieu Edel Kampelmacher: cf. milieu Kristensen gélose EMB (ou gélose Lévine, gélose Teague) gélose Endo gélose à l'esculine gélose à l'extrait de malt gélose à l'extrait de riz F [ modifier | modifier le code] bouillon Fraser G [ modifier | modifier le code] bouillon glucosé tamponné (ou BGT) milieu GVPC H [ modifier | modifier le code] gélose Hektoen milieu Hoyle milieu Hugh Leifson gélose de Hynes: cf. gélose DCL bouillon hypertonique K [ modifier | modifier le code] milieu King A milieu King B milieu Kirschner milieu Kligler Hajna milieu Kristensen (ou BPLS, ou Edel Kampelmacher) L [ modifier | modifier le code] milieu lactose BCP: cf. milieu BCP gélose lactosée au désoxycholate (ou DLA) gélose lactosée au Tergitol 7 et au TTC gélose lactosée au vert brillant et au rouge de phénol: cf. milieu Kristensen bouillon lactosé bilié au vert brillant (ou BLBVB) milieu LB milieu LDC (enzyme): cf. milieu de Moeller gélose Lévine: cf. gélose EMB milieu Litsky milieu Loeffler milieu Löwenstein Jensen (ou LJ) gélose lysine fer M [ modifier | modifier le code] bouillon M17 gélose M17 gélose MacConkey gélose MacConkey sorbitol (ou SMAC): cf.

Si nécessaire, le mélange est bouilli pendant 1 minute pour aider à la dissolution totale. Servir dans des flacons de 100 ml ou des tubes de 10 ml selon les besoins. Autoclave à 121 ° C pendant 15 minutes. Laisser refroidir et utiliser ou conserver au réfrigérateur. Le pH final du milieu est de 7, 2 ± 0, 2. La couleur du milieu déshydraté est beige clair et le milieu préparé est ambre clair. Préparation aux tests de fermentation A la préparation précédente - avant la stérilisation - le glucide doit être ajouté à une concentration finale de 1%, plus l'indicateur Andrade (acide fuchsine) ou le rouge de phénol (0, 018 g / L). Les tubes doivent être équipés d'une cloche Durham pour observer la formation de gaz. Autres variantes de l'eau peptonée Eau peptonée tamponnée ou tamponnée Il contient de l'hydrolysat enzymatique de caséine, du chlorure de sodium, du dihydrogénophosphate de potassium et de l'hydrogénophosphate de sodium dodécahydraté. Le pH final est de 7, 0 ± 0, 2. Pour sa préparation, peser 20 g de milieu déshydraté et dissoudre dans 1 litre d'eau distillée.