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Regardons, à présent, l'influence de l'indice de réfraction de la lame de verre sur le couplage en champ proche de l'émission d'un ensemble de dipôles orienté de façon isotrope. Pour cela, nous considérons deux types de lame de verre: − une lame de verre d'indice de réfraction 1, 51 qui est l'indice de réfraction du verre BK7 classiquement utilisé pour les lames de microscope, − une lame de verre d'indice de réfraction 1, 8 qui est l'indice de réfraction du verre SF11 (Schott). Les diagrammes d'émission pour un ensemble de dipôles orientés de façon isotrope et situés à 10 nm de ces lames de verre sont: Figure 3. 12. Diagramme d'émission d'un ensemble de dipôle orientés de façon isotrope et situés à une altitude de 10 nm par rapport à une lame de verre d'indice de réfraction 1, 8 (en rouge) et 1, 51 (en bleu). On a également reporté les deux droites qui matérialisent les angles limites de réflexion totale θc entre les milieux 3 et 5 et qui séparent l'émission sous-critique (pour des angles inférieur à θc) de l'émission sur-critique (pour des angles supérieur à θc).

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On augmente alors l'intervalle des ondes qui sont propagatives dans le milieu 5 et évanescentes dans le milieu 3 (ondes pour lesquelles k3 < kr < k5, c'est-à-dire 1 < u < n3/n5). Les dipôles ont alors plus de possibilités de se dé-exciter dans ces modes, c'est-à-dire dans la zone sur-critique de la lame de verre. En conclusion, plus l'écart d'indice de réfraction entre le milieu extérieur et la lame de verre est important et plus il sera possible de collecter une part importante de la fluorescence des dipôles dans la lame de verre. Discrimination du signal de volume du signal de surface Regardons l'effet du contraste d'indice de réfraction entre le milieu extérieur et la lame de verre sur le couplage de la fluorescence en fonction de l'altitude du dipôle. Pour cela, nous calculons le spectre d'énergie dissipée dP/du(u) d'un ensemble de dipôles orientés aléatoirement à l'interface d'une lame de verre d'indice de réfraction n5 égal à 1, 5 ou 1, 8 pour différentes altitudes de dipôles. L'intégration de dP/du(u) sur les différents domaines d'émission possibles des dipôles permet alors de déterminer la répartition de l'énergie émise par les dipôles.

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La solution que nous avons choisie est alors d'augmenter le contraste d'indice à la surface de la lame grâce au dépôt d'une couche mince de fort indice de réfraction.

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