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Objectifs -Connaître les exigences des textes réglementaires et des principales lignes directrices, -Situer la place de la validation dans le CTD, -Acquérir le vocabulaire et les définitions des différents critères de validation, -Acquérir les méthodologies de validation, -Comprendre les outils statistiques utilisés, -Savoir optimiser les protocoles expérimentaux. Description Introduction à la validation des méthodes analytiques. -Objectifs d'une méthode analytique et de sa validation, -Spécifications et résultats d'analyse, -Contexte réglementaire et normatif: o Historique, o Recommandations: ICH Q2A, Q2B, FDA, Pharmacopée européenne, ISO... -Bibliographie. Validation analytique dans le dossier CTD. Définitions et terminologies. -Les différents critères de validation: usuels et spécifiques, -Les différents types d'essais et les paramètres requis, -Critères d'acceptation. Protocoles expérimentaux de la validation analytique: approches méthodologiques. Études de cas de validation analytique et traitement des données.
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-Cas de l'essai des substances apparentées: impuretés du PA et du PF, paramètres critiques de validation, exemples de démarche, -Validation d'une recherche de solvants résiduels: méthode des ajouts dosés, méthode quantitative ou essai limite, -Cas d'un dosage HPLC, cas d'un dosage potentiométrique, -Autres cas: identification d'un composé, essai de dissolution... -Exemple de traitement de données avec Excel. Validation analytique et conformité du système d'analyse. Outils statistiques appliqués à la validation des méthodes analytiques. -Distribution normale, statistiques descriptives, échantillonnage, -Intervalles de confiance et intervalles de dispersion, -Tests d'hypothèse, -Ajustement linéaire, -Analyse de variance. Protocoles expérimentaux de la validation analytique: démarches statistiques associées. -Rappel de la démarche publiée dans STP Pharma 1992, -Les critères de validation: méthodes d'obtention et tests statistiques associés (spécificité, linéarité, fidélité, sensibilité, exactitude, limites de détection, limites de quantification... ), -Exemples d'application, -Analyse critique de cette démarche.
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(courbe d'étalonnage externe - Voir la méthode des moindres carrés). Attention aux effets de matrice qui doivent être de la même nature en échantillon et étalon. L'échantillon doit donc être prétraité. Méthode comparative: on compare l'échantillon à une série d'étalon de référence certifié de matrice ayant une composition similaire à l'échantillon. Ce dernier ne subit pas de prétraitement. La justesse, la répétabilité, la reproductibilité et la sensibilité sont les facteurs les plus importants dans la qualité d'une méthode. La sensibilité: si la méthode est sensible, une faible variation de concentration entraîne une forte variation du signal et vice-versa. Dans la validation d'une méthode d'analyse Le but est de démontrer que les résultats obtenus par cette méthode sont reproductibles. validation des appareils validation de la méthode chaque étape de la procédure analytique (minéralisation, extraction,, purification, séparation) entraîne des erreurs. L'analyste doit donc identifier et minimiser les sources d'erreurs.
conditions de répétabilité: conditions où les résultats d'essai indépendants sont obtenus par la même méthode sur des individus d'essai identiques dans le même laboratoire, par le même opérateur, utilisant le même équipement et pendant un court intervalle de temps. conditions de reproductibilité: conditions où les résultats d'essai sont obtenus par la même méthode sur des individus d'essais identiques dans différents laboratoires, avec différents opérateurs et utilisant des équipements différents. - Linéarité: capacité d'une méthode d'analyse, à l'intérieur d'un certain intervalle, à fournir une réponse instrumentale ou des résultats proportionnels à la quantité en analyte à doser dans l'échantillon pour laboratoire. - Spécificité: Une procédure d'analyse est dite « spécifique » lorsqu'elle permet de garantir que le signal mesuré provient seulement de la substance à analyser. Il s'agit de démontrer que la ou les substance(s) quantifiée(s) au sein de la matrice sont bien le ou les analyte(s) recherché(s).