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Les organismes dépourvus de cytochrome c dans le cadre de leur chaîne respiratoire n'oxydent pas le réactif, le laissant incolore dans les limites du test, et sont oxydase-négatifs. Les bactéries oxydase positives possèdent une cytochrome oxydase ou une indophénol oxydase (une hémoprotéine contenant du fer). Les deux catalysent le transport des électrons des composés donneurs (NADH) vers les accepteurs d'électrons (généralement l'oxygène)., Le réactif d'essai, le dichlorhydrate de n, N, N', N'-tétraméthyl-p-phénylènediamine, agit comme un accepteur artificiel d'électrons pour l'enzyme oxydase. Le réactif oxydé forme le composé coloré indophénol bleu. le système cytochrome n'est généralement présent que chez les organismes aérobies capables d'utiliser l'oxygène comme récepteur final de l'hydrogène. Teste d’oxydase - : Résultats et discussion. Le produit final de ce métabolisme est l'eau ou le peroxyde d'hydrogène (décomposé par la catalase). but/utilisations du Test D'oxydase Le test d'oxydase est utilisé pour déterminer si un organisme possède l'enzyme cytochrome oxydase., Le test est utilisé comme aide à la différenciation des espèces de Neisseria, Moraxella, Campylobacter et Pasteurella (oxydase positive).

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Laisser le plant à la température de la pièce de 24 à 48 heures. Lire la réaction obtenue.  Réaction positive: La zone foliaireinoculée avec labactérie devientlégèrementtranslucide et aun aspecthumide. Par lasuite, les tissuss'assèchent etprennent unecoloration bruneclair à beige (une plage nécrotique).  Réaction négative: Aucunchangement dans lacouleur etl'aspect jaunissement ou un brunissement sans assèchement de la zone foliaire inoculée n'est pas une réaction positive. V. Teste de virulence (Test de pathogénicité sur tranches de pomme de terre) Dans notre travail on a testé 6 isolats d'Erwinia sur 6 variétés différentes de pomme de terre. Les isolats utilisés sont: SOL, SA, MAI, EA, ZA et JELLY. Test D'Oxydase-Principe, Utilisations, Procédure, Types, Interprétation Des Résultats... | Yakaranda. Les variétés de pomme de terre sont: Désiré, Spunta, Laura, Margaritte, Bellarosa et Condor. Le protocole utilisé pour réaliser ces deux essais est inspiré de celui de (Haynes et al., 1997). Les tubercules sont d'abord lavés bien à l'eau et stérilisés en surface par trempage dans de l'éthanol à 70% et bref passage sous la flamme d'un bec Bunsen [Fig.

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 Laprésence de bulles d'oxygène: Labactérie possède la catalase, elle est dite →Catalase+.  L'absence de bulles d'oxygène: La bactérie ne possède pas lacatalase, elle est dite →Catalase-. 1. TESTS UTILISES EN BACTERIOLOGIE - biologie. 4. teste de Hugh Leifson:  Le milieu OF, milieu de base pour la détermination de l'oxydation et de la fermentation selon Hugh et Leifson couramment dénommé milieu de Hugh et Leifson, a été mis au point par ces deux microbiologistes en 1953 pour étudier le métabolisme oxydatif et fermentatif des micro-organismes durant la dégradation des glucides (Delarras., 2007). a. Préparation du milieu: [voir annexe 1]  Ce milieu permet de déterminer la voie d'attaque du glucose utilisé comme source d'énergie par la plupart des bactéries. Pour synthétiser de l'énergie, les bactéries peuvent attaquer par: • Voie oxydative: le glucose est utilisé uniquement en présence de dioxygène (faible libération d'acides). • Voie fermentative: le glucose est utilisé en absence de dioxygène et en présence de dioxygène ou seulement en absence de dioxygène (forte libération d'acides) (LNPV., 2005).

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La lecture des résultats se font à l'aide de vapeur de lugol: On met du lugol dans boite en verre, ensuite mètre cette dernière sur la flamme jusqu'à ébullition de lugol et avoir de vapeur, à ce moment on dépose notre boite de LPAA de façon que la vapeur passe directement sur le milieu. Résultat positive la boite se colore en bleu et la bactérie qui a dégradé l'amidon est entourée d'un cercle transparent. 1. Teste d'hypersensibilité au tabac: 2. IV. Teste d'hypersensibilité du tabac Le test d'hypersensibilité du tabac met en évidence le pouvoir pathogène d'une bactérie suite au dessèchement des zones d'inoculation sur les feuilles de tabac. Préparer une suspension bactérienne d'Erwinia de l'ordre de 10 9 ufc/ml d'une culture jeune (24h à 48h). Utiliser un plant de tabac ayant atteint le stade de 5 à 6 feuilles. À l'aide d'une seringue tuberculine de 1 ml, injecter la suspension bactérienne dans l'espace intercellulaire le long de la nervure centrale ou de la nervure secondaire. Test à l'oxydase. Figure 22: L'exposition de souche àLa vapeur de lugol (personnelle., 2016) Figure 23: L'aspect del'activité L'inoculation de la suspension bactérienne se fait sur la surface inférieure de la feuille.

De plus, il est difficile de maintenir constante la température au cours de l'expérience. On peut aussi mettre en évidence la dénaturation de l'enzyme par la chaleur. Concentration de substrat Concentration d'enzyme Recherche de la composition des osides La glucose-oxydase peut permettre de faire découvrir, au moins en partie, la composition de certains osides. Exemples: le saccharose et l'amidon. Le saccharose peut être hydrolysé par un filtrat obtenu après macération pendant quelques minutes d'un gramme de levures dans 10 mL d'eau. Il convient de faire deux témoins, l'un avec le saccharose non hydrolysé et l'autre avec l'extrait de levures seul. La glucose-oxydase montre la présence de glucose dans l'hydrolysat. Il est à noter que l'hydrolyse du saccharose donne de l'α-D-glucose et du β-D-fructose. Aucun de ces sucres ne devrait réagir avec l'enzyme. Cependant, il y a mutarotation spontanée de l'alpha-D-glucose en beta-D-glucose. Il est donc inutile d'ajouter de la mutarotase comme certains livres le préconisent.