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De plus, il est difficile de maintenir constante la température au cours de l'expérience. On peut aussi mettre en évidence la dénaturation de l'enzyme par la chaleur. Concentration de substrat Concentration d'enzyme Recherche de la composition des osides La glucose-oxydase peut permettre de faire découvrir, au moins en partie, la composition de certains osides. Exemples: le saccharose et l'amidon. Le saccharose peut être hydrolysé par un filtrat obtenu après macération pendant quelques minutes d'un gramme de levures dans 10 mL d'eau. Il convient de faire deux témoins, l'un avec le saccharose non hydrolysé et l'autre avec l'extrait de levures seul. La glucose-oxydase montre la présence de glucose dans l'hydrolysat. Il est à noter que l'hydrolyse du saccharose donne de l'α-D-glucose et du β-D-fructose. Aucun de ces sucres ne devrait réagir avec l'enzyme. Test à l'oxydase. Cependant, il y a mutarotation spontanée de l'alpha-D-glucose en beta-D-glucose. Il est donc inutile d'ajouter de la mutarotase comme certains livres le préconisent.
La présence des taches rose violette: La bactérie possède l'activité oxydase, elle est dite Oxydase+. L'absence des taches rose violette: La bactérie ne possède pas l'activité oxydase, elle est dite Oxydase-. 1. 2. 3. test de la catalase: La catalase est une enzyme présente chez la plupart des bactéries aérobies strictes et anaérobies facultatives. Elle décompose l'eau oxygénée formée, en eau et en oxygène qui se dégage. La recherche de cette enzyme est utile pour différencier les bactéries appartenant aux familles des Micrococcaceae, Dermcoccaceae, Staphylococcaceae, Streptococcaceae, Enterococcaceae. 2H 2 O 2 catalase → O 2 + 2H 2 a. Protocole: O Déposer sur une lame une goutte d'eau oxygénée (= peroxyde d'hydrogène) à l'aide d'une pipette Pasteur. Prélever une colonie à l'aide de l'anse. Mètre la colonie dans la goutte. Figure 18:Teste de catalase (photos personnelle., 2016). L'utilisation de l'anse est possible à condition qu'elle ne possède pas d'action catalasique, ce que l'on vérifiera facilement par un test sans bactérie.