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2. Méthode appliquée à la séparation des colorants du sirop de menthe. L'étiquette d'un sirop de menthe indique la présence de deux colorants E102 et E131. Pour réaliser la séparation des deux colorants, on réalise une chromatographie sur colonne. Le mélange coloré favorise le suivi de la séparation. On choisira un premier éluant qui n'entraîne qu'un des colorant puis un second éluant qui n'entraîne que le deuxième colorant. Utilisons un cylindre de verre placé verticalement, au bas duquel se trouve un robinet. Colonne en verre pour chromatographie 2. La colonne est remplie à une certaine hauteur par un solide absorbant (phase fixe, par exemple, alumine) imprégné et recouvert d'un solvant (par exemple, eau). Il faut veiller à ce que l'absorbant ne soit jamais sec! Le sirop de menthe est déposé au sommet de la colonne. En ouvrant le robinet, le sirop pénètre à la surface de l'alumine. Les colorants se séparent et se fixent sur l'alumine ou s'échangent avec le solvant. On fait passer à la suite du sirop de menthe, le premier éluant qui lave la colonne et entraîne l'un des colorant.
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Colonnes LC à basse ou moyenne pression
Mise en place du matériel La réalisation d'une colonne impose de respecter certaines règles qui permettront une séparation efficace. On place tout d'abord un morceau de coton au fond de la colonne que l'on recouvre d'éluant, afin d'éliminer l'air emprisonné dans le coton. On rajoute un demi centimètre du sable environ au dessus du coton, afin que la phase stationnaire ne puisse pas s'échapper de la colonne. On considérera ici que le sable n'a pas de propriétés adsorbantes. Enfin, on remplit la colonne avec la phase stationnaire en réalisant une suspension de silice dans le premier éluant qui est l'eau salée. Personnalisé 120mm Chromatographie Colonne W/2 50mL Réservoirs | eBay. Le gel ainsi formé est introduit dans la colonne grâce à l'entonnoir. On rince avec l'éluant et on le laisse s'écouler. Une fois la colonne remplie, on rajoute un demi centimètre de sable en tête de colonne au dessus de la surface de silice, après s'être assuré que cette dernière était plane. Cette couche permet de réaliser des dépôts et d'ajouter de l'éluant sans perturber la surface de silice, ce qui empêcherait une bonne séparation.
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