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Friday, 2 August 2024

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Introduction La préparation d'une coupe histologique consiste à réaliser des sections, c'est-à-dire des tranches très fines de tissus destinés à être observés par transparence au microscope. Les coupes à congélation présentent certains avantages que la technique en paraffine n'offre pas: la congélation permet une conservation optimale de l'ADN et de l'ARN. Par ailleurs, certaines protéines dont les épitopes sont dénaturés sous l'action du formol ne peuvent être étudiées en immunohistochimie qu'à partir d'échantillons congelés. De même, certains éléments solubles ne peuvent être marqués ou colorés qu'en utilisant des échantillons congelés. Coupe ovaire microscope parts. Enfin les coupes à congélation permettent un échantillonnage exhaustif des tissus analysés (coupes sériées d'un cerveau entier de rongeur, par exemple). Les coupes au vibratome ne nécessitent ni l'inclusion en paraffine, ni la congélation des spécimens et sont parfois requises quand les protéines tissulaires étudiées sont dénaturées par ces procédures.

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Observation microscopique d'une coupe d'ovaire de lapine en "phase folliculaire" on Vimeo

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Coupe d'ovaire à faible grossissement De taille variable, on observe de nombreuses structures plus ou moins arrondies appelées follicules. Ovaire. Coupe d'ovaire à grossissement moyen Le plus grand des follicules possède une cavité qui constitue plus de la moitié du follicule. Près de cette cavité, un ovule est en cours de préparation. Coupe d'ovaire à fort grossissement On distingue l'ovule entouré de nombreuses cellules folliculaires L'ovule contient un noyau Photo d'une ovulation Dans le cercle, l'ovule en train d'être expulsé de l'ovaire. L'ovulation a lieu au 14ème jour pour un cycle de 28 jours

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Les coupes obtenues sont dites « flottantes » car conservées dans un milieu liquide. Stockage: à +4°C, dans un tampon additionné d'un anti bactérien (ex Azide de sodium), ou à -20°C dans une solution de DMSO/Glycerol ou d'éthylène-glycol (plusieurs années) 4 HM450 (MMFrance) Cryostat La réalisation de coupes de tissu congelé peut aussi être réalisée sur un cryostat. Les tissus sont enrobés dans un liquide (ex O. C. T. ) sous forme de gel à température ambiante qui se solidifie en dessous de -10°C. La dureté du tissu congelé permet de réaliser des coupes plus minces qu'avec un microtome à congélation et les coupes sont, la plupart du temps, directement collectées sur lames. Coupe ovaire microscope vs. Type échantillon: Frais ou fixés congelés Epaisseur des coupes: 10 à 100µm Le cryostat est utilisé pour couper des sections congelées à basse température (-20 °C < -30°C). Il dispose d'une enceinte réfrigérée qui maintient la température de l'échantillon. Les coupes obtenues sont récupérées sur des lames. Stockage: dans des boites au congélateur (-20°C ou -80°C), plusieurs années 3 CM3050S (Leica), 1 CM1950 (Leica), 2 HM560 (MMFrance), 1 NX50 (MMFrance) Vibratome Le vibratome fonctionne en coupant à l'aide d'une lame de rasoir vibrante, ce qui permet d'appliquer moins de pression sur l'échantillon au moment de la coupe et d'éviter toute procédure d'enrobage (paraffine, congélation).

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Type échantillon: Fixés ou frais (non congelés) Epaisseur des coupes: 40µm à 400µm Stockage: +4°C, dans une solution physiologique contenant un anti-bactérien (eg PBS-azide). 1 HM650V MMFrance), 2 VT1000S (Leica), 1 VT1200 (Leica)

Cette visite s'inscrit dans une tournée européenne de l'émir qui l'a aussi conduit en Espagne, en Allemagne, au Royaume-Uni et au Forum économique mondial de Davos.

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