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Elle est utilisée aussi bien pour l'analyse qualitative que pour l'analyse quantitative. Les applications s'étendent des méthodes de séparation manuelles simples en CCM classique aux méthodes automatisées en CCM haute performance (HPTLC: high performance thin layer chromatography). Cuves rectangulaires pour chromatographie. Avantages de la chromatographie sur couche mince: Capacité élevée de traitement des échantillons en peu de temps Approprié pour les tests de criblage Méthode pilote pour CLHP La couche prête à l'emploi pour CCM agit comme une mémoire de données pour les résultats de séparation Les substances séparées sont utilisables pour des analyses ultérieures (par ex. IR, MS) Le passage de la phase mobile à la phase stationnaire permet d'optimiser la séparation de façon rapide et économique
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Si l'éluant choisi est polaire, il fera migrer plus facilement le composé P, ayant plus de facilité à l'emmener dans la phase mobile. On voit par cet exemple que la polarité de l'éluant tiens un rôle décisif lors de la migration des composés. Considérons maintenant que la CCM est indifférente à l'éluant (! ). Si seul le support compte, tout dépend de la nature des interactions entre les molécules du mélange et celles composant le support. Il s'agit généralement d'interactions de type liaison hydrogène. Supposons un support donneur d'hydrogène (D). Si dans le mélange se trouve des composés accepteur d'hydrogène (A), et d'autre indifférents (I), migreront plus facilement les composés indifférents aux liaisons hydrogènes. La situation est souvent bien plus complexe que celle décrite dans les deux exemples précédents. Il n'existe donc pas de théorie pour la CCM permettant de choisir le bon éluant (c'est lui le plus dur à trouver! ), le support étant généralement de la silice. Cuves à chromatographie (lot de 10) - Jeulin. Nous contacter
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Mise en place du matériel On place environ 10 mL d'éluant dans la cuve à chromatographie, afin d'avoir un demi centimètre d'éluant au fond de celle-ci. On y place le papier absorbant et on referme la cuve afin de laisser le temps à l'équilibre liquide/vapeur d'être atteint. On trace un trait au crayon de papier à environ 1, 5 cm du bas de la plaque, sans appuyer et sans y laisser ses empreintes. Ce trait est appelé ligne de dépôt. Réalisation de l'expérience L'éluant utilisé doit être adapté aux composés à séparer. Dans le cas des colorants du sirop de menthe, on utilisera un mélange constitué de 70% en volume d'eau salée à 40 g/L et 30% en volume d'éthanol. Cuve chromatographique, fabricant cuve chromatographie. L'étape importante de cette manipulation est le dépôt des espèces chimiques sur la plaque. On dépose à l'aide d'un capillaire les espèces à séparer, diluées dans un solvant, si possible identique à l'éluant ou suffisamment volatil, au niveau de la ligne de dépôt en réalisant des dépôts séparés de 1 à 2 cm entre eux et du bord de la plaque.
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On réalise la même expérience avec le benzaldéhyde non coloré. On utilise une plaque de silice spéciale imbibée d'un agent qui devient fluorescent sous une radiation de longueur d'onde de 254 nm. Les espèces chimiques, qui ici comportent un cycle benzénique, absorbent les rayonnements UV et leur présence empêche toute fluorescence et permet ainsi l'observation de taches sombres sur la plaque à l'endroit où ces espèces chimiques ont migré. On observe ici deux taches, indiquant que le benzaldéhyde n'est pas pur. On entoure les différentes taches au crayon de papier, ce qui nous permet de visualiser celles-ci à la lumière du jour. Nous avons vu que la technique de CCM est une technique fiable et rapide. Ceci explique son emploi très fréquent dans les laboratoires. Notons cependant qu'il est parfois indispensable d'utiliser d'autres méthodes de révélation que celles présentées ici comme la révélation au diiode ou à l'acide phosphomolybdique dans le cas de composés oxydables. Quitter la lecture zen
Présentation du matériel Nous avons ici besoin de ces différents éléments: cuve et couvercle, papier absorbant, plaque de CCM (silice) capillaire éluants: premier éluant: 70% en volume d'eau salée à 40g/L 30% en volume d'éthanol deuxième éluant: 66% en volume de cyclohexane 33% en volume d'acétone colorants: tartrazine, bleu patenté V, solution contenant le mélange sirop menthe, benzaldéhyde et acide benzoïque. Revenons sur quelques uns de ces éléments: La plaque chromatographique est en général constituée de deux parties: une couche d'environ 0, 25 mm de gel de silice, fixée à une plaque rigide en aluminium (c'est le cas ici), en plastique ou parfois en verre. La fixation est assurée par un liant qui peut être du sulfate de calcium hydraté, de l'amidon ou un polymère organique. Le papier absorbant, comme on le verra lors de la manipulation, permet de saturer la cuve en vapeur d'éluant, ce qui évitera à l'éluant présent sur la plaque de s'évaporer et donc de perturber l'analyse chromatographique.
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Pendant que dans tout le reste de l'Europe le chocolat était conché (séparation de la poudre de cacao du beurre et puis re-travail de ces deux ingrédients à chaud) et passait à une fabrication industrielle, il restait ce petit îlot de fabrication artisanale du chocolat. Je trouve ça assez impressionnant. Comment est-il fabriqué et quel est son goût? Le chocolat de Modica est fabriqué à l'ancienne dans le sens où le cacao n'est pas séparé du beurre de cacao ( pas de phase de conchage donc, je l'explique ICI). La pâte est d'abord écrasée sur un plan de pierre concave avec différents types de rouleau toujours en pierre. Ensuite la masse totale en poudre est chauffée entre 35°C-40°C, donc considérée à froid, on y ajoute du sucre et de épices. Du fait de cette température le sucre ne fond pas, ce qui donne au chocolat une texture rustique et granuleuse (très différente du chocolat que nous avons l'habitude de manger). Apparemment cette faible température permet de garder la saveur de tous les composants, inaltérés.
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