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La nécessité de disposer d'échantillons parfaits est primordiale en raison de la longue durée du processus, bien qu'il soit impossible de savoir si l'échantillon mérite vraiment d'être analysé tant que le processus n'est pas terminé et que les résultats ne sont pas visibles. Manque de fiabilité des échantillons Les échantillons qui passent au microscope électronique à transmission doivent être transparents pour les électrons. Cela signifie que le matériau donné doit être mince au niveau moléculaire, ce qui peut entraîner des changements inattendus dans sa structure, ce qui modifiera les résultats des tests. Le microscope lui-même peut constituer un danger pour l'échantillon de matériau, car le faisceau d'électrons peut l'endommager. Cela est particulièrement vrai pour les échantillons biologiques. Petite taille de la vision La vue générée par un microscope à transmission électronique est très petite, car les échantillons doivent littéralement être transparents aux électrons pour être vus.
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Ces électrons focalisés frappent l'échantillon sur la scène et rebondissent sur l'échantillon, créant des rayons X dans le processus. Les électrons rebondis ou dispersés, ainsi que les rayons X, sont convertis en un signal qui transmet une image à un écran de télévision où le scientifique regarde le spécimen. Avantages du microscope électronique à transmission Le microscope optique et le microscope électronique à transmission utilisent des échantillons en tranches fines. L'avantage du microscope électronique à transmission est qu'il grossit les échantillons à un degré beaucoup plus élevé qu'un microscope optique. Un grossissement de 10 000 fois ou plus est possible, ce qui permet aux scientifiques de voir des structures extrêmement petites. Pour les biologistes, le fonctionnement intérieur des cellules, comme les mitochondries et les organites, est clairement visible. Le microscope électronique à transmission offre une excellente résolution de la structure cristallographique des échantillons et peut même montrer la disposition des atomes dans un échantillon.
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Microscope électronique à balayage (SEM): Le microscope électronique à balayage ou SEM dépend de l'émission d'électrons secondaires de la couche supérieure de l'échantillon. Les microscopes électroniques à balayage peuvent fournir une grande profondeur de mise au point grâce à laquelle il peut être utilisé comme microscope optique stéréo. Cela nous aide à imager les propriétés structurelles et physiques extrêmement délicates et détaillées des cellules, tissus, organites et autres complexes macromoléculaires qui ne peuvent pas être réalisées avec la TEM. Les microscopes électroniques à balayage remplissent ses applications dans le comptage cellulaire, la détermination de la taille des complexes macromoléculaires et le contrôle des processus. La conception du microscope est appelée microscope électronique à balayage car ce microscope génère des images en balayant la surface de l'échantillon à l'aide d'un faisceau d'électrons. Les émissions de surface diffusées sont ensuite collectées à l'aide de détecteurs.
En ce qui concerne les échantillons de matériaux hydratés, presque tous les spécimens biologiques doivent être préparés de diverses façons pour les stabiliser, réduire leur épaisseur (ultrathin sections) et pour accroître leur contraste (coloration). Ces processus peuvent mener à des artefacts, mais ils peuvent généralement être identifiés en comparant les résultats obtenus à l'aide de méthodes de préparation radicalement différentes. Les scientifiques travaillant dans le domaine estiment généralement, après comparaison des résultats des différentes techniques de préparation, qu'il n'y a pas de raison qu'elles produisent toutes des artefacts similaires, et qu'il est donc raisonnable de croire que les images fournies par la microscopie (La microscopie est l'observation d'un échantillon (placé dans une préparation microscopique... ) électronique correspondent à la réalité des cellules vivantes. En outre, les résultats à plus haute résolution ont été directement comparés aux résultats de la cristallographie aux rayons X, en fournissant une confirmation indépendante de la validité de cette technique.