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Sunday, 30 June 2024

Quelles sont les bases de l'HPLC? Un peu de théorie La théorie illustrée Pour m'entrainer Pour en savoir plus Le détecteur de fluorescence Le principe de la détection de fluorescence se base sur la propriété que possèdent certaines molécules organiques de pouvoir émettre un rayonnement lumineux après excitation par un rayonnement ultra-violet ou proche visible. Un exemple commun de fluorescence se retrouve dans les vêtements réagissant à la lumière noire que l'on peut trouver en boîte de nuit. En fluorescence, la longueur d'onde du rayonnement émis par la molécule (appelée longueur d'onde d'émission ou λem) est différente et toujours plus élevée que la longueur d'onde du rayonnement d'excitation (appelée longueur d'onde d'excitation ou λex). Détecteur uv visible hplc protection. Ainsi, l'analyse se fera à l'aide d'un couple λex/λem qui est bien plus sélectif que la longueur d'onde d'absorption UV. Cette méthode permet donc des analyses plus spécifiques et bien plus sensibles qu'avec un détecteur UV (lorsque les molécules fluorescent, ce qui n'est pas le cas de toutes les molécules absorbant en UV).

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Fluorimétrie Fluorimètres à faisceau unique Un spectrofluorimètre à faisceau unique consiste en une source de rayonnement (généralement une lampe au mercure ou au xénon), un filtre primaire (excitation), une cellule d'échantillonnage, un filtre secondaire (émission) et un système de détection de fluorescence. Dans la plupart de ces fluorimètres, le détecteur est placé sur un axe à 90 ° de celui du faisceau d'excitation. Cette géométrie à angle droit permet au rayonnement d'excitation de traverser l'échantillon d'essai et de ne pas contaminer le signal de sortie reçu par le détecteur de fluorescence. Cependant, le détecteur reçoit inévitablement une partie du rayonnement d'excitation en raison des propriétés de diffusion inhérentes des solutions elles-mêmes, ou si de la poussière ou d'autres solides sont présents. Les filtres sont utilisés pour éliminer cette dispersion résiduelle. Détecteurs HPLC et RHPLC. Le filtre primaire sélectionne le rayonnement de courte longueur d'onde capable d'exciter l'échantillon d'essai, tandis que le filtre secondaire est normalement un filtre de coupure nette qui permet de transmettre la fluorescence de plus grande longueur d'onde, mais bloque l'excitation diffusée.

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détecteur universel: détection des composés sans chromophores mesures quantitatives logiciel: Chemstation HPLC UV - (Waters) pompe quaternaire 600E UV-visible (barrette de diodes PDA). logiciel: Empower pompe binaire 1525 UV-visible (barrette de diodes PDA). logiciel: Empower - demande d'analyse HPLC-MS-UV FONCTIONNEMENT: Fournir 1 à 10mg d'échantillon sec dans un tube à hémolyse ou un eppendorf fermé (sans parafilm). Remplir une demande d'analyse HPLC en précisant l'analyse souhaitée, et les conditions si elles sont connues. Pour toute demande d'analyse, connaître les tarifs, merci de prendre contact au préalable avec le service. Détecteur uv visible hplc photo. - Contacts: Alexandre MACIUK — Responsable scientifique écrire un mail: 01 46 83 53 77 Karine LEBLANC — Responsable opérationnelle écrire un mail: 01 46 83 58 72 Somia RHARRABTI écrire un mail

Le système chromatographique peut être équipé d'un détecteur fluorimétrique (HPLC-FL). Dans le cas de médicaments faiblement fluorescents ou non fluorescents, un certain nombre de réactions de dérivatisation bien caractérisées sont disponibles. Détecteur UV/Visible 2489 (UV/Vis) : Waters. Ceux-ci comprennent le chlorure de dansyle (chlorure 5-diméthylaminonaphtalène-1-sulfonyl) pour les amines primaires et secondaires et les groupes hydroxyle phénoliques et la fluorescamine {4-phenylspiro- [furan-2 (3H), 1′-isobenzofuran] -3, 3′- dione} et o-phtalaldéhyde pour les amines primaires. Les réactions de dérivatisation de ce type ont étendu le champ de détection de fluorescence en HPLC significatif. Le même type de détecteurs (DAD / fluorescence) peut être couplée à l'électrophorèse capillaire (CE-DAD ou CE-FL) ou par Chromatographie d'ions pour déterminer les composants chargés dans les mélanges complexe.

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