Dosage Des Glucides Par Spectrophotométrie: Chambres D Hotes Dans Le Calvados 14 Minutes

Le dosage est réalisé à partir d'une prise d'essai de 200 µL de l'extrait de sucres solubles, complétée à 1 mL avec de l'eau distillée. Immédiatement après l'ajout de 500 µL du réactif au DNS, une incubation de 5 min à 100°C est réalisée. Après 5 min de centrifugation à 5000 g, la lecture de la densité optique se fait à 530 nm sur une aliquote du surnageant diluée à l'eau distillée. La gamme étalon est réalisée dans les mêmes conditions de dilution avec une solution de glucose. Les résultats sont exprimés en mmol par g de matière sèche. Dosage des glucides par spectrophotométrie pour. III. 5 Teneur en carbone organique total (COT) Les analyses sont réalisées avec un analyseur de carbone (COT mètre, Shimadzu) à partir de 15 à 20 mg de poudre sèche qui est carbonisée à 200°C (méthode SSM-TC). L'appareil donne directement la masse de carbone organique total exprimée en pourcentage de la masse sèche de l'échantillon. Pour chaque échantillon deux répétitions sont effectuées. III. 6 Extraction et dosage des nitrates dans les racines L'extraction des nitrates est réalisée à partir de 50 à 200 mg de poudre fine végétale mis en incubation dans 5 mL d'eau déminéralisée, pendant 1 heure à 45°C.

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Le surnageant est obtenu après une centrifugation de 15 min à 2500 g (Thomas et Hilker 2000). Les nitrates sont 57 ensuite dosés selon la méthode utilisée pour le dosage de l'azote minéral des sols, par spectrophotométrie, avec un analyseur automatisé de type Skalar. III. 7 Extraction et dosage des acides aminés L'extraction se fait sur 20 mg de matière sèche en poudre, en deux incubations successives de 30 min, avec deux fois 750 µL d'éthanol à 70%. Les surnageants sont récupérés après 15 min de centrifugation à 10000 g. Les surnageants des deux incubations successives sont réunis. Les acides aminés sont dosés à partir d'un réactif de ninhydrine, selon la méthode de Moore et Stein (1954). L'absorbance du composé bleu violet formé est mesurée au spectrophotomètre, à 570 nm. Dosage des glucides par spectrophotométrie l. La gamme étalon est réalisée avec une solution de leucine. Les résultats sont exprimés en µmol par g de matière sèche. III. 8 Extraction et dosage des chlorophylles Les teneurs en chlorophylles a et b sont évaluées selon la méthode de Lichtenthaler (1987).

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L'extraction se fait à partir de 10 mg de poudre sèche dans 1, 5 mL d'acétone à 80%. Après agitation, les échantillons sont centrifugés à 14000 g pendant 5 min. Les teneurs en chlorophylles a et b sont calculées à partir de la lecture des absorbances à 663 nm (A663) et à 642 nm (A642) contre un blanc contenant uniquement de l'acétone. Les concentrations en pigment sont données par les équations suivantes: - Chl a (µg/mL) = (12, 58 x A663) - (2, 93 x A642) - Chl b (µg/mL) = (21, 14 x A642) - (5, 09 x A663) Les résultats sont ensuite exprimés en mg de pigment par g de matière sèche. Bière : dosage biochimique des glucides résiduels. III. 9 Extraction et dosage de l'azote soluble, insoluble et total (Kjeldahl) L'azote insoluble et l'azote total sont dosés suivant le principe de la méthode de Kjeldahl, dont est déduite la teneur en azote soluble. Les composés azotés des échantillons secs en poudre (50 mg) sont minéralisés à l'aide d'acide sulfurique concentré, contenant une concentration élevée de potassium (ce qui permet d'élever le point d'ébullition du mélange) et en présence de sélénium (catalyseur), pour former du sulfate d'ammonium.

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La quantité totale d'amidon dans les organes des semis est calculée (pour chaque plant) à partir de la teneur en amidon de l'organe considéré multipliée par la masse sèche de cet organe. La quantité totale d'amidon dans un semis est calculée par l'addition des quantités totales d'amidon des différents organes. III. 3 Dosage du saccharose Le saccharose est dosé avec un réactif à l'anthrone selon la méthode de van Handel (1968). Une déshydratation forte du sucre par chauffage en milieu acide conduit à la formation d'un III. Dosage des glucides par spectrophotométrie principe. 5 Analyses biochimiques 56 dérivé furfural qui réagit avec l'anthrone pour donner un produit coloré en vert. Préalablement, un traitement alcalin est réalisé à chaud afin d'éliminer les sucres autres que le saccharose, celui-ci restant stable dans ces conditions (Jones et al. 1977). Un aliquot de l'extrait de sucres soluble de 25 à 100 µL (complétée à 100 µL avec de l'eau distillée) est mise en incubation 10 min à 100°C en présence de 100 µL d'une solution de KOH à 30% (m/v).

fonction du temps de l'une des formes du coenzyme (voir détails dans le cours). Dosage spé physique.

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