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Tuesday, 13 August 2024

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– Humidifier un disque de diméthyl paraphényléne diamine, avec une goutte d'eau distillée. – Prélever une colonie et l'écraser sur le disque avec une pipette Pasteur. La présence d'une cytochrome oxydase se traduit par l'apparition d'une coloration brun-noir sur le disque. Page suivante: 3-6-3- Recherche de la catalase: Retour au menu: Helicobacter pylori: Etude bactériologique des premières souches isolées à l'Hôpital Bologhine Ibn Ziri

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10/11/2009, 14h08 #1 fredpruch Oxydase et catalase ------ Bonjour, Je suis étudiante en BTS diététique et je ne comprends pas les notions d'oxydase et de catalase qui servent à identifier les bactéries! Est ce que quelqu'un peut m'expliquer? D'avance merci! ----- Aujourd'hui 10/11/2009, 18h50 #2 Re: Oxydase et catalase Quand on cherche à identififier une bactérie plutôt que de faire 36 000 tests et de trier la pagaille ensuite, on suit une démarche raisonnée, une sorte de raccourci. On sait qu'en général il est efficace de commencer par rechercher le résultat de la coloration de Gram et la forme du micro-organisme. En fonction du résultat on recherche des caracrtères différents. Exemple: On observe un coque Gram +. Or (presque)tous les coques Gram + sont oxydase -, c'est-à-dire qu'ils ne possèdent pas l'enzyme cytochrome oxydase, ce test est inutile pour permettre de déterminer le genre. Par contre certains coques possèdent l'enzyme catalase, et d'autres ne l'ont pas. C'est donc un test discriminant qui permettra de faire des hypothèse sur l'identité de la bactérie étudiée.

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☰ Le test de l'oxydase est un test de détection de l'enzyme cytochrome oxydase chez les bacteries Gram négative qui produisent cette enzyme, telles que Neisseria ou Pseudomonas. ☰ Les Disques Oxydase (OX) sont des disques de papier absorbant imprégnés de N, N, N', N'-Tetramethyl-p-phenylenediamine dihydrochloride. En présence de cytochrome oxydase, le N, N, N', N'-Tetramethyl-p-phenylenediamine dihydrochloride (incolore) forme un composé coloré en bleu. Mode Opératoire de l'Oxydase A l'aide de pinces, placer un disque d'oxydase sur une lame porte objet. Choisir une colonie bien isolée et représentative de la culture fraiche à tester. Prélever la colonie choisie à l'aide d'un bâtonnet ou d'une öse. NE PAS UTILISER d'öse de métal (à l'exception du platine) cela peut provoquer des réactions faussement positives. Frotter doucement la colonie sur le disque et observer l'apparition d'une coloration violette dans un délai de 30 secondes. Lecture de test de l'Oxydase: ☰ Réaction positive: coloration bleu foncé à violet apparaissant dans un délai de 30 secondes.

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