Dosage Des Glucides Par Spectrophotométrie D / Maison A Vendre Ars Sur Moselle Paris
En rouge, les absorbances (A) obtenues par deux essais qui, par lecture graphique, donnent la quantité de matière. Après l'obtention des valeurs d'absorbance de la gamme d'étalonnage, on trace la courbe d'absorption en fonction des quantités (ou le plus souvent des concentrations) de composé. Une droite doit passer par l'origine du repère et être proche de chaque point d'étalonnage si la gamme a été bien réalisée ( coefficient de corrélation supérieur à 99, 95%, par exemple). On reporte à cette droite la valeur d'absorbance de l'essai (la solution initiale a été éventuellement microfiltrée) pour déterminer la quantité de composé présent. Pour remonter à la concentration en composé à analyser présent dans le milieu initial, on tient compte du volume de la prise d'essai et de la dilution éventuelle. Dosage des glucides par spectrophotométrie d'absorption. Voir aussi [ modifier | modifier le code] Dosage du glucose par le DNS Dosage du phosphore par la méthode de Briggs (colorimétrique) Dosage des protéines par le réactif de Biuret (colorimétrique) Dosage des protéines par la méthode de l'acide bicinchonique (BCA) (colorimétrique) Tube de Nessler
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Dosage Des Glucides Par Spectrophotométrie D'absorption
Un tube 0 ou blanc doit impérativement être réalisé pour annuler l'absorbance due aux réactifs eux-mêmes. Ce tube ne contient pas d'échantillon de composé à doser. La réalisation d'une gamme d'étalonnage demande beaucoup de précision (utilisation de fioles jaugées, de pipettes... ), et doit être, de préférence, réalisée dans les mêmes conditions que les essais et par le même opérateur. Dosage des glucides par spectrophotométrie def. Réalisation d'un tableau colorimétrique [ modifier | modifier le code] La réalisation d'un tableau colorimétrique permet d'éviter des erreurs lors de la réalisation de protocoles et de noter les résultats. Voici en exemple le tableau colorimétrique d'un dosage du glucose par le DNS. Tableau colorimétrique (résultats expérimentaux) N° de tube 0 1 2 3 4 5 x1 x2 Solution étalon de glucose à 0, 01 mol/L en mL 0, 3 0, 6 0, 9 1, 2 1, 5 Prise d'essai en mL 0, 5 1, 0 Eau distillée en mL 18, 0 17, 7 17, 4 17, 1 16, 8 16, 5 17, 5 17, 0 DNS (réactif) en mL 2, 0 Absorbance à 350 nm pour un tube/une cuve donné(e) 0, 205 0, 494 0, 748 1, 022 1, 280 0, 668 1, 340 Quantité de glucose en µmol 3, 0 6, 0 9, 0 12, 0 15, 0 7, 9 hors gamme Lecture des résultats [ modifier | modifier le code] En bleu, la droite obtenue par une gamme d'étalonnage.
Si ces premières conditions sont remplies, un dosage colorimétrique peut être possible. Réalisation d'une gamme d'étalonnage [ modifier | modifier le code] Pour régler le spectrophotomètre, la réalisation d'une gamme d'étalonnage est indispensable (y compris pour certains kits vendus dans le commerce). Cette gamme permet de déterminer une absorbance à une longueur d'onde donnée, pour un tube donné ou une cuve de spectrophotomètre de longueur donnée, pour une concentration en composé recherché. Dosage des glucides par spectrophotométrie 2. Il faut donc préparer une solution de l'élément à doser de faible concentration. Pour la réalisation de la gamme d'étalonnage et du dosage, le volume final de liquide dans chaque tube doit être identique. Or les volumes de réactifs doivent rester constants pour permettre la réaction, et les quantités (reliées aux concentrations) de composé à doser doivent varier dans chaque tube. Dans certaines méthodes de dosage, on complète avec de l'eau distillée à un même volume (par exemple 100 ml) en ajustant le niveau à un trait de jauge.
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