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PasseportSanté Analyses médicales Electrophorèse des protéines plasmatiques: diagnostic et interprétation L'électrophorèse des protéines sériques est un examen effectué à partir d'une prise de sang qui permet le diagnostic et le suivi de nombreuses maladies comme une immunoglobuline monoclonale, une hypergammaglobulinémie et plus rarement une hypogammaglobulinémie. Qu'est-ce que l'électrophorèse des protéines sériques? L'électrophorèse des protéines sériques (EPS) est un examen de biologie médicale. Il a pour objectif la séparation des protéines présentes dans la partie liquide du sang (le sérum). « Ces protéines exercent notamment un rôle de transport de nombreuses molécules (hormones, lipides, médicaments…), et interviennent également dans la coagulation, l'immunité, le maintien de la pression sanguine. Cette séparation va permettre de les identifier et de les quantifier », précise le Dr Sophie Lyon, Biologiste médical. L'analyse des protéines Après une prise de sang, les protéines sont analysées par migration dans un champ électrique.

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TD: Extraction et purification de l'ADN. Recherche parmi 272 000+ dissertations Par • 22 Octobre 2017 • TD • 1 070 Mots (5 Pages) • 2 852 Vues Page 1 sur 5 Extraction et purification de l'ADN génomique Introduction: L'extraction de l'ADN est une technique permettant d'isoler l'ADN de cellules ou de tissus. L'ADN ainsi extrait peut ensuite être utilisé pour des recherches de biologie moléculaire, telles que le séquençage, la PCR ou le clonage. Il existe différents protocoles pour extraire l'ADN, qui suivent approximativement le même schéma de principe: Lyse des cellules bactériennes Elimination des protéines Elimination des autres acides nucléiques (ARN... ) Concentration de l'ADN par précipitation à l'alcool But L'objectif de ce TP est d'acquérir quelques techniques de base de la biologie moléculaire. Dans un premier temps une extraction et purification de l'ADN génomique sera réalisée sur une bactérie Gram+ et -. Par la suite un profile électrophorétique sur gel d'agarose sera effectué pour vérifier la présence de l'ADN purifié.

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Cette masse moléculaire est comparée à des étalons commerciaux calibrés en unité de masse protéique ( Dalton). Protéinogramme [ modifier | modifier le code] Résultat d'une électrophorèse de protéines sériques. Un protéinogramme est une électrophorèse des protéines sériques. Il s'agit d'un examen médical fréquent et peu coûteux. Il se présente sous la forme d'un tracé comprenant cinq fractions: albumine, α 1 - globulines, α 2 -globulines, β-globulines et γ-globulines. Le plasma ne convient pas pour cet examen car il contient notamment du fibrinogène qui fausse les résultats. De même, un sérum hémolysé est une source d'erreur d'interprétation car la présence d' hémoglobine modifie le tracé. Albumine [ modifier | modifier le code] C'est la fraction la plus importante (environ 60%). Elle est homogène et pure (ne contient que l' albumine). Un dédoublement du pic sur l'électrophorèse signe une bisalbuminémie. Une diminution de cette fraction traduisant une hypoalbuminémie s'observe lors d'une cirrhose hépatique ou de syndrome néphrotique.

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En fonction de la nature de la charge du réseau, les particules chargées migreront soit vers la cathode, soit vers l'anode. À titre d'exemple, lorsqu'un champ électrique traverse un gel de pH neutre, les groupes de phosphates chargés négativement de l'ADN provoquent la migration de celui-ci vers l'anode (Westermeier, 1997). L'électrophorèse à travers l'agarose est une méthode utilisée de façon standard pour séparer, identifier et purifier des fragments d'ADN. La technique est simple et facile à réaliser et peut dissoudre des fragments d'ADN que d'autres procédures ne permettent pas de séparer correctement. La position de l'ADN dans le gel peut, par ailleurs, être déterminée en teintant celui-ci avec une faible concentration de bromure d'éthidium, un fluorochrome s'intercalant entre les bases de l'ADN. Le bromure d'éthidium est un mutagène/carcinogène puissant et modérément toxique. Veillez à toujours porter des gants lors de la manipulation de solutions et de gels contenant du bromure d'éthidium....

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Quand réaliser une EPS? Il faut réaliser une EPS lorsqu'on se trouve devant: Un taux de protides circulants élevé; Une élévation inexpliquée de la vitesse de sédimentation (VS); Des infections répétées en particulier bactériennes (recherche d'un déficit immunitaire responsable d'une hypogammaglobulinémie); Des manifestations cliniques ou biologiques (une hypercalcémie, par exemple) faisant suspecter la survenue d'un myélome ou d'une hémopathie; Une suspicion de syndrome inflammatoire; Une cirrhose éventuellement; Toute exploration d'ostéoporose. Valeurs de référence d'une EPS Selon les protéines, les valeurs de référence doivent se situer entre: Albumine: 55 et 65% soit 36 et 50 g /L. Alpha1 - globulines: 1 et 4% soit 1 et 5 g /L 2 - globulines: 6 et 10% soit 4 et 8 g/l - globulines: 8 et 14% soit 5 et 12 g /L. Gamma - globulines: 12 et 20% soit 8 et 16 g /L. Interprétation de l'électrophorèse L'électrophorèse va alors identifier des groupes de protéines augmentées ou diminuées dans le sérum.

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Selon l'HAS, il est recommandé d'adresser le patient pour avis complémentaire: Si la présentation clinique du patient évoque une hémopathie maligne (douleurs osseuses, altération de l'état général, adénopathies, syndrome tumoral); en cas d'anomalie biologique (anémie, hypercalcémie, insuffisance rénale) ou à l'imagerie (lésions osseuses) faisant suspecter une atteinte d'organe; en l'absence de tels symptômes, le patient dont au moins un des examens de première intention est anormal, ou dont l'immunoglobuline monoclonale sérique est une IgG? 15 g/L, une IgA ou une IgM? 10 g/L; si le patient a moins de 60 ans. Traitement recommandé Le traitement d'une anomalie de l'électrophorèse est celui de la pathologie qu'elle révèle. « Par exemple, en cas d'hyperprotidémie totale due à une déshydratation, le traitement sera la réhydratation. En cas d'augmentation des alpha-globulines due à un syndrome inflammatoire, le traitement sera celui de la cause de l'inflammation. Dans tous les cas, c'est le médecin qui, à l'aide de cet examen ainsi que d'autres examens complémentaires (bilan sanguin, radiologique…), fera le diagnostic au cours de la consultation et prescrira le traitement adapté à la pathologie retrouvée ».

Utilisations non médicales [ modifier | modifier le code] Certains sociétés et laboratoires d'analyses génétiques utilisent la technique de l'électrophorèse sur l'ADN pour obtenir des images décoratives qui représentent le profil génétique, ou bien imitent l'image générée par l'électrophorèse pour créer lesdites images. Notes et références [ modifier | modifier le code] ↑ Neil Campbell et Jane Reece, 2007, Biologie, 430 Annexes [ modifier | modifier le code] Articles connexes [ modifier | modifier le code] Cuve d'électrophorèse Protéomique Biophysique Cataphorèse Migration (matière) Spectrométrie de masse Spectrométrie de mobilité ionique Techniques de biologie moléculaire Diélectrophorèse Électrorotation Lien externe [ modifier | modifier le code]