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TP SVT Spécialité Expérience du foie lavé de Claude Bernard - YouTube
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Claude Bernard cherche le devenir du glucose issu de la digestion des aliments. Il réalise une expérience devenue célèbre sous le nom d'expérience du foie lavé (1855). Doc 8 Expérience du foie lavé « J'ai choisi un chien adulte, vigoureux et bien portant je le sacrifiai 7 h après un repas riche en tripes. Aussitôt, le foie fut enlevé, et cet organe soumis à un lavage continu par la veine porte [... ] « Je laissai ce foie soumis à un lavage continu pendant 40 min j'avais constaté au début de l'expérience que l'eau qui jaillissait par les veines hépatiques était sucrée je constatai en fin d'expérience que l'eau qui sortait ne renfermait plus aucune trace de sucre. « J'abandonnai dans un vase ce foie à température ambiante et, revenu 24 h après, je constatai que cet organe que j'avais laissé la veille complètement vide de sucre s'en trouvait pourvu très abondamment. » Après une analyse rigoureuse du compte rendu de cette expérience, proposez une interprétation des résultats à l'aide de vos connaissances.
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7. Filtrez ou centrifugez. 8. Précipitez le glycogène en ajoutant deux volumes d'éthanol à 95% pour un volume de filtrat. # Mortier, pilon, sable de Fontainebleau # Bec Bunsen, # Verrerie: tube à essai, ballon, pipette. # Réactifs: sulfate de potassium en poudre, éthanol à 95% 2. Broyez les fragments dans un mortier avec le sable de Fontainebleau jusqu'à l'obtention d'une pâte homogène (en ajoutant 20 mL d'eau distillée). 3. Placez la suspension dans un ballon et ajoutez- y une pointe de sulfate de sodium 4. Portez quelques minutes à ébullition (sans laisser s'évaporer tout le liquide). 5. Filtrez ou centrifugez.. 6. Précipitez le glycogène en ajoutant deux volumes d'éthanol à 95% pour un volume de filtrat. Remarque: on peut aussi révéler le glycogène en ajoutant quelques gouttes d'eau iodée qui prend une coloration brun acajou en présence du polymère de glucose. Pensez alors à faire un témoin.
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Foie frais ou congelé de porc, Ciseaux fins, Bêcher de 100 mL, Eau du robinet, Bandelettes glucose (ex: clinistix, bandelettes réactives au glucose pour analyses d'urine (12 euros les 50 bandelettes) Passoire, Eau distillée, Bec électrique. Protocole expérimental 1. Découpez l'échantillon de foie en morceaux cubiques de 1 à 2 cm de côté. 2. Lavez soigneusement 1 à 2 morceaux sous le robinet jusqu'à ce que l'eau qui s'écoule soit dépourvue de sang. 3. Placez ces morceaux dans le bêcher contenant 50 mL d'eau distillé légèrement et réalisez un test glucose (pour cela tremper une bandelette glucose dans l'eau du bêcher). Notez le résultat R 1. 4. Versez les morceaux de foie dans l'entonnoir (avec ceux des autres élèves) et les lavez soigneusement sous le robinet pendant 10 minutes. 5. Placez ces morceaux dans le bêcher contenant 50 mL d'eau distillée. 6. Agitez légèrement et réalisez un test glucose. Notez le résultat R 2. 7. Laissez les morceaux de foie tremper dans l'eau du bêcher pendant 20 minutes.
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L'hypothèse n'est qu'une explication temporaire: soumise à l'épreuve de l'expérience, elle peut être réfutée par les résultats obtenus et conduire à de nouvelles hypothèses; vérifiée, elle devient une explication. C'est de cette manière que progressent depuis rnard les sciences biologiques. Toutes les découvertes de rnard et la théorisation de la science physiologique sont révolutionnaires pour son époque. Mais il ne se contente pas d'établir solidement les fondements de la biologie expérimentale. N'oublions pas qu'il est médecin de formation. Il aborde donc la médecine avec les mêmes principes et considère que les maladies ne sont pas des entités mystérieuses douées d'une existence propre comme on le croyait alors: pour lui, chaque maladie reflète un désordre physiologique sous-jacent. Ainsi, le diabète qui se traduit par la présence d'une concentration de glucose trop élevée dans le sang avec pour conséquence son élimination dans les urines est-il dû à un dysfonctionnement des mécanismes qui, normalement, maintiennent la concentration en glucose proche de 1 g/l.
Si ce n'est pas le cas, refaire la manipulation. 9. Le dessin est à faire au grossissement maximal, éventuellement avec l'objectif à immersion. D. Documents complémentaires: 1. Complétez l'équation en notant la formule du glucose, équilibrez. Sur les flèches, notez glycogénolyse et glycogénogenèse. 2. Quelle information importante supplémentaire donne le document ci- dessous? ----------------------- [pic] B. L'expérience historique du foie lavé. En 1855, Claude Bernard réalise une expérience demeurée célèbre. Il décrit cette expérience dite du foie lavé en ces termes: «J'ai choisi un chien adulte, vigoureux et bien portant qui depuis plusieurs jours, était nourri de viande; je le sacrifiai 7 heures après un repas copieux de tripes. Aussitôt, le foie fut enlevé, et cet organe fut soumis à un lavage continu par la veine porte...... Je laissai ce foie soumis à ce lavage continu pendant quarante minutes; j'avais constaté au début de l'expérience que l'eau colorée en rouge qui jaillissait par les veines hépatiques était sucrée; je constatai en fin d'expérience que l'eau, parfaitement incolore qui sortait, ne renfermait plus aucune trace de sucre......
Selon l'origine du foie et la date de l'abattage, la quantité de glycogène présent dans les cellules du foie est extrêmement variable. Protocole expérimental: 1. Inciser ou couper un petit morceau de foie et gratter avec le scalpel la surface de la section de façon à déposer sur une lame un échantillon de la taille d'une tête d'allumette. 2. Etaler et dissocier au maximum l'échantillon avec le scalpel pour séparer les cellules. 3. Recouvrir d'une goutte d'eau iodée. Laisser agir de une à plusieurs minutes. 4. Déposer une goutte de glycérine (glycérol) et bien mélanger avec la pointe du scalpel. Le glycérol évite l'évaporation du milieu de montage. Si vous ne mettez pas de glycérol, la durée d'observation sera brève. 5. Poser une lamelle sur l'échantillon. 6. Utiliser du papier essuie-tout pour presser sur la lamelle en effectuant quelques mouvements latéraux de façon à dissocier les cellules (attention à ne pas casser la lamelle). 7. Si nécessaire, essuyer la surface de la lamelle. 8. Observer au microscope à faible grossissement pour rechercher les régions de la préparation où les cellules sont dissociées et suffisamment colorées.