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Au bout de deux générations cellulaires, Meselson et Stahl observent la présence d'ADN hybride et d'ADN léger. Ceci permet de conclure quant aux deux modèles restants: Résultats attendus après deux générations Ces schémas permettent de confronter les résultats obtenus après deux générations, à savoir de l'ADN hybride et de l'ADN léger, avec les résultats attendus selon les deux modèles encore possibles suite aux observations précédentes (après une génération). A gauche, résultat attendu pour le modèle semi-conservatif: ADN hybride et ADN léger A droite, résultat attendu pour le modèle dispersif: ADN hybride En conclusion, seul le modèle semi-conservatif permet d'aboutir à une concordance entre résultats attendus et résultats observés. Conclusion L'expérience de Meselson et Stahl permet donc de mettre en évidence le fait que la réplication de l'ADN se réalise selon un mode semi-conservatif. Représentation schématique de la population de fragments d'ADN au cours des générations Au début de l'expérience tout l'ADN des bactéries est formé de deux brins d'ADN lourd (rouge).
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Share Pin Tweet Send Le Expérience de Meselson – Stahl est une expérience de Matthew Meselson et Franklin Stahl en 1958 qui a soutenu Watson et Crampe l'hypothèse de Réplication de l'ADN était semi-conservateur. En réplication semi-conservatrice, lorsque l'hélice d'ADN double brin est répliquée, chacun des deux nouveaux ADN les hélices se composaient d'un brin de l'hélice d'origine et d'un autre nouvellement synthétisé. Elle a été qualifiée de «la plus belle expérience de biologie». [1] Meselson et Stahl ont décidé que la meilleure façon de marquer l'ADN parent serait de changer l'un des atomes de la molécule d'ADN parente. Étant donné que l'azote se trouve dans les bases azotées de chaque nucléotide, ils ont décidé d'utiliser un isotope d'azote pour faire la distinction entre l'ADN parent et l'ADN nouvellement copié. L'isotope de l'azote avait un neutron supplémentaire dans le noyau, ce qui le rendait plus lourd. Hypothèse Un résumé des trois méthodes postulées de synthèse de l'ADN Trois hypothèses avaient été précédemment proposées pour la méthode de réplication de l'ADN.
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L'énoncé Questionnaire à Choix Multiple: tu peux cocher une réponse par item. Tu as obtenu le score de Question 1 Quels sont les résultats de l'expérience de Meselson et Stahl, après centrifugation des bactéries? 25% d'ADN hybride et 75% d'ADN léger. 25% d'ADN léger et 75% d'ADN hybride. 50% d'ADN hybride et 50% d'ADN léger. Question 2 Lorsqu'il y a une réplication conservative de la mitose, qu'advient-il? Les deux cellules filles sont formées de deux ADN vieux (ADN initial) pour être ainsi complémentaires. Il se forme deux cellules filles, une avec un ADN vieux (ADN initial) et l'autre avec un ADN neuf (constitué de deux brins néoformés). Les deux ADN se trouvent mélangés (vieux et neuf) et ne forment qu'un. Question 3 Que contient la boîte de Pétri dans laquelle Meselson et Stahl mettent des bactéries avec des mitoses très rapides? De l'azote liquide, appelé azote 14 pour y cultiver les bactéries. De l'azote lourd, nommé azote 15 pour y cultiver les bactéries. De l'azote lourd, appelé azote 14 pour y cultiver les bactéries.
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L'expérience: Des bactéries sont cultivées sur un milieu ne contenant que de l'azote lourd ( 15 N, sachant que l'azote « naturel » est 14 N). Leur ADN est donc composé avec des atomes d'azote lourd. Ces bactéries sont ensuite placées sur un milieu ne contenant que de l'azote léger 14 N. L'ADN maintenant synthétisé sera donc constitué d'azote 14 N, le seul présent dans le milieu. Les divisions des bactéries sont synchronisées. Le schéma suivant présente les molécules d'ADN suivant les trois hypothèses: L'azote lourd est représenté en bleu et l'azote léger en rouge. Résultats: Pour savoir quel modèle est le bon, l'ADN des bactéries est extrait après la première, la deuxième et la troisième réplications (rappelons nous que les divisions ont été synchronisées donc toutes les bactéries sont au même stade de leur cycle cellulaire en même temps), placé dans une solution de chlorure de Césium et centrifugé. La position des ADN est repérée par une mesure de la densité optique. Cette manipulation permet de séparer les molécules d'ADN selon leur poids.
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Cette expérience, réalisée en 1958 par les biologistes Meselson et Stahl, a pour but de comprendre le mécanisme de la réplication des molécules d'ADN. Lors de l'interphase, chaque molécule d'ADN est « dédoublé » en vue de la mitose. Meselson et Stahl, au cours de leur célèbre expérience, vont déterminer le mécanisme de ce « dédoublement ». Les hypothèses: Pour expliquer le mécanisme, trois hypothèses ont été faites: Modèle conservatif: à partir d'une molécule d'ADN, on forme une nouvelle molécule d'ADN sans "toucher" à la prelière. On garde donc ici une molécule "mère" non modifiée (elle est donc conservée). Modèle semi-conservatif: chaque brin de la molécule à répliquer sert de matrice à la synthèse d'un brin complémentaire, pour obtenir deux molécules d'ADN identiques. Chaque nouvelle molécule "fille" ne conserve donc que la moitié de la molécule "mère". Modèle dispersif: aucun brin n'est conservé intact. Les deux molécules "filles" sont crées à partir de fragments de la molécule "mère" dispersés dans chacune des deux molécules et de copies de ces fragments.
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Dans l'hypothèse conservatrice, après réplication, une molécule est la «vieille» molécule entièrement conservée, et l'autre est tout l'ADN nouvellement synthétisé. L'hypothèse semi-conservatrice prédit que chaque molécule après réplication contiendra un ancien et un nouveau brin. Le modèle dispersif prédit que chaque brin de chaque nouvelle molécule contiendra un mélange d'ADN ancien et nouveau. [5] Procédure expérimentale et résultats Azote est un constituant majeur de l'ADN. 14 N est de loin le plus abondant isotope d'azote, mais avec l'ADN le plus lourd (mais non radioactif) 15 N isotope est également fonctionnel. E. coli a été cultivé pendant plusieurs générations dans un milieu contenant du NH 4 Cl avec 15 N. Lorsque l'ADN est extrait de ces cellules et centrifugé sur un sel ( CsCl) gradient de densité, l'ADN se sépare au point où sa densité est égale à celle de la solution saline. L'ADN des cellules cultivées dans 15 Le milieu N avait une densité plus élevée que les cellules cultivées normalement 14 N moyen.
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