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Pour les articles homonymes, voir CMF. La cytométrie en flux ( CMF) est une technique de caractérisation individuelle, quantitative et qualitative, de particules en suspension dans un liquide. Un appareil fait défiler des particules, molécules ou cellules, à grande vitesse dans le faisceau d'un laser. La lumière issue, par diffusion ou fluorescence, du cytomètre permet de compter et de classer la population étudiée suivant plusieurs critères. Cytomètre en flux prix du carburant. Principe [ modifier | modifier le code] Fluorescence Activated Cell Sorting (FACS) principle Il s'agit d'analyser les signaux optiques ou physiques émis par une particule coupant le faisceau lumineux d'un laser ou d'une lampe à arc. Les signaux mesurés sont essentiellement relatifs: aux propriétés optiques intrinsèques des particules; ils correspondent aux phénomènes de diffusion lumineuse liés aux dimensions de la particule, à leur structure interne ou à l'auto- fluorescence de certaines cellules comme les végétaux, le phytoplancton, etc. aux propriétés optiques induites de fluorescence obtenues par des marquages spécifiques (par ex.
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Le fluorochrome absorbe l'énergie du laser et réémet l'énergie absorbée sous forme de photons d'une longueur d'onde plus élevée: fluorochromes à affinité propre pour un constituant cellulaire: par exemple pour les mesures d' ADN, d' ARN, de protéines, du pH, de calcium contenus dans la cellule; fluorochromes couplés à un ligand spécifique. Coût du cytomètre en flux - Prix de la machine de cytométrie en flux de haut niveau - Yuesen Med. Cette spécificité peut être amenée par un couplage du fluorochrome à un anticorps ou un ligand spécifique d'un constituant cellulaire; tandem de fluorochromes, deux fluorochromes couplés à un anticorps, permet d'utiliser un fluorochrome qui ne serait normalement pas excité pour un laser donné. Le premier fluorochrome est donc excité par un laser, l'émission de longueur d'onde se trouvant dans le spectre d'absorption du second, excite à son tour le deuxième fluorochrome qui émet donc sa propre longueur d'onde. Principales applications [ modifier | modifier le code] Utilisation de la cytométrie en flux en océanographie L' hématologie a été l'une des premières disciplines médicales à bénéficier des applications cliniques de la cytométrie en flux.
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Lumière diffusée [ modifier | modifier le code] La lumière diffusée renseigne sur la morphologie et la structure de la particule. Si la diffusion de la lumière est mesurée dans l'axe du rayon incident, l'intensité du signal peut être corrélée avec la taille et la viabilité cellulaire. Sous un angle de 90°, la mesure correspond à la structure intracellulaire de la cellule (réfringence du cytoplasme, granulosité, morphologie, rapport nucléo-cytoplasmique). Cytomètre - Tous les fabricants de matériel médical. L'utilisation simultanée de ces deux paramètres permet de distinguer, dans un sang périphérique par exemple, les plaquettes, les lymphocytes, les monocytes et les polynucléaires. Lumière absorbée [ modifier | modifier le code] Cette mesure évolue proportionnellement au diamètre de la cellule (supposée sphérique) et à l'indice d'absorption des constituants cellulaires [Quoi? ]. Fluorescence émise [ modifier | modifier le code] Cette fluorescence peut être spontanée, mais le plus souvent, elle est apportée à la cellule par un fluorochrome.
1934: Premier article traitant de la cytométrie en flux, publié dans Science par Moldovan. Il y explique le comptage de cellules circulant dans un tube capillaire devant un détecteur photoélectrique. 1941: Utilisation d'anticorps couplés à une molécule fluorescente ( fluorochrome), l' anthracène, pour détecter des pneumocoques [ 1] 1972: Création de l'appareil nommé FACS (triage de sous population) 1994: commercialisation du premier trieur de cellule à haute vitesse 2006: Une vingtaine de sociétés commercialisent des appareils de cytométrie en flux, certains sont capables d'analyser les cellules à la vitesse de 100, 000 évènements par seconde. C'est un des domaines d'intérêt de l' analyse biologique et plus largement de l' évaluation environnementale. On espère pouvoir un jour assurer ainsi un monitoring automatisé de la qualité de l'eau, et de ses variations par le suivi de bioindicateurs. Signaux recueillis [ modifier | modifier le code] Les signaux optiques recueillis ont une intensité corrélée avec les propriétés particulaires.
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