Dosage De La Cafeine Par Etalonnage | Cape De Portage Bébé – Tuto
973 mots 4 pages Analyschim/chromato/ JF Perrin 2000-2011 page 1/3 Dosage de la caféine dans un soda-cola par HPLC La technique utilisée est la Chromatographie Liquide Haute Performance (HPLC). La phase stationnaire est constituée de grains d'une silice greffée d'un motif hydrocarboné apolaire en C18 (polarité de phase inversée). La phase mobile est un mélange polaire méthanol/eau utilisé en élution isocratique ou gradient. L'éluat est suivi en continu par spectrophotométrie à 272 nm. Le dosage est possible par la méthode de l'étalonnage externe, par la méthode des ajouts dosés, après extraction liquide/liquide et utilisation d'un étalon interne. C1. Préalable Il s'agit essentiellement de justifier le réglage du détecteur de sortie de colonne HPLC, un spectrophotomètre en ligne réglé sur 272 nm. On propose le spectre d'une solution étalon de caféine à 0, 02 g/L en solvant méthanol/eau 4/60 (v/v), contre le solvant, dans l'intervalle 230 nm – 400 nm. On propose aussi le spectre d'absorption du soda-cola fourni dilué au 1/10 en solvant méthanol/eau 4/60 (v/v), contre le solvant, dans l'intervalle 230 nm – 400 nm.
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Dosage De La Cafeine Par Etalonnage Interne
Déterminer les paramètres des régressions linéaires (a, b, c, d et coefficient de détermination): Acaféine = a caféine + b et hcaféine = c caféine + d. 2. 2. Dosage de la caféine contenue dans le Coca-cola Dans une fiole jaugée de 20 mL, introduire le volume adapté (de l'ordre de 30 µL, mesuré exactement) de solution mère (FM) et compléter à 20 mL avec l'éluant. La solution ainsi préparée est appelée solution fille FF. Injecter en CLHP la solution fille FF. Q3. A partir des courbes d'étalonnage, déterminer Ccaféine pour la fiole FF. En déduire la concentration de la caféine dans la fiole mère FM puis dans le Coca-cola. 3. Dosage de la caféine par CLHP par la méthode de l'étalon interne 3. Préparation de la fiole étalon et injection du mélange étalon Préparer la fiole étalon (FEEI) en y introduisant 30 µL de la solution de caféine étalon (FE0) et 150 µL de la solution d'étalon interne de concentration proche de 1 g. L-1 (FEI). Concentration de l'étalon de caféine dans FE0: caféine dans FEEI: Concentration de l'étalon interne dans FEI: interne dans FEEI: g. L-1 Injecter en CLHP la solution FEEI.
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La boucle d'injection est de 20 µL. La détection se fait par barrette de diodes à 254 nm. La seringue utilisée a une capacité de 250 µL. Q1. Se renseigner sur la signification de chacun de ces termes. Injecter une solution étalon de caféine en CLHP et reporter dans le tableau ci-dessous la hauteur et la surface du pic chromatographique de la caféine. Effectuer les dilutions au demi (à 50%: pipette jaugée de 10 mL / fiole jaugée de 20 mL) et effectuer les mesures de la hauteur et de la surface. Renouveler jusqu'à avoir mis en évidence un domaine de linéarité pour un des paramètres. Concentration de la solution étalon de caféine (100 mL) FE0 de concentration exacte connue et proche de 1 g. L-1 dans l'éluant: Fiole mère Facteur de dilution Concentration / µ Hauteur de pic (H) Surface de pic (A) 4, 985 g. L-1 FE0 1 FE1 1/2 FE2 1/4 FE3 1/8 FE4 1/16 FE5 1/32 3487, 8 263, 33 3388, 6 232, 75 2502, 4 175, 25 1738, 3 98, 24 873, 3 50, 66 443, 3 25, 65 FE6 1/64 FE7 1/128 FE8 1/256 FE9 1/512 FE10 1/1024 FE11 1/2048 224, 1 12, 57 118, 7 6, 87 59, 6 3, 46 30, 3 1, 78 15, 2 0, 95 8, 6 0, 63 Q2.
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Le diagnostic biologique d' insuffisance surrénalienne repose sur des dosages de cortisol basal dans le sang à 8h, et, le cas échéant, après stimulation par Synacthène®. Pourquoi mon cortisol est bas? Le taux de cortisol peut diminuer en cas d'insuffisance cortico-surrénalienne, d'insuffisance de fonctionnement de l'hypophyse ou de l'hypothalamus ou de maladie d'Addison. Pourquoi un taux de cortisol bas? Un taux faible de cortisol traduit une insuffisance cortico-surrénalienne, une insuffisance du fonctionnement de l'hypophyse ou de l'hypothalamus, ou une maladie d'Addison. Les diagnostics possibles sont: Insuffisance corticosurrénalienne: Maladie d'Addison. Comment faire baisser un taux élevé de cortisol? Cortisol et sommeil Réaliser un exercice de respiration abdominale au moment du coucher. Il réduit la sécrétion de cortisol en vous plongeant dans un état de détente. Éviter la caféine après l'heure du déjeuner. Éteindre les écrans le soir. Cesser toute activité physique 1h avant le coucher.
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La phase aqueuse est refroidie donc la caféine redevient très peu soluble dans l'eau à 25°C. Cependant, la caféine est très soluble dans le dichlorométhane donc la majeure partie de la caféine se trouve dans la phase organique (dichlorométhane). 1. 4) La technique mis en œuvre dans l'étape 2 est la décantation (ou extraction liquide-liquide) qui permet de séparer deux liquide non miscibles. 1. 5) Le sulfate de magnésium anhydre permet de déshydrater la phase organique en éliminant les traces d'eau encore présentes dans la phase organique. 1. 6) On peut purifier la caféine extraite par recristallisation. La technique consiste à dissoudre dans un premier temps le solide impur dans un solvant (adapté où les impuretés sont solubles) à chaud ce qui permet de libérer les impuretés. Puis on laisse lentement refroidir. On peut éventuellement favoriser la recristallisation par un bain d'eau glacée. Une fois le solide recristallisé les impuretés restent en solution, il suffit donc de filtrer la solution sur filtre Büchner par exemple pour récupérer le solide pur.
Discussion: spectres annotés. C2. Réactifs et conditions opératoires générales pour les chromatographies • Méthanol et eau pour réaliser la phase mobile. • Injecteur à boucle d'injection de 20 µL équipé d'un filtre 0, 45 µm. • Colonne de silice greffée en C18 (de 15 cm de longueur et de 0, 4 cm de diamètre) avec précolonne de protection; débit à 0, 5 mL/min. • Détecteur spectrophotométrique à lecture continue réglé à 272 nm. Enregistreur-intégrateur à atténuation réglable et vitesse du papier d'enregistrement réglable. • Coca-cola® et coca-cola® décaféïné, 'café' et 'café décaféiné' à partir de café moulu commercial. • Solution étalon de caféine à 0, 2 g/L dans du méthanol qualité HPLC, à filtrer et à dégazer. Utilisation de la chaîne HPLC disponible L'appareil proposé réalise les gradients. L'appareil proposé
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