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Répondre à la discussion Affichage des résultats 1 à 3 sur 3 02/01/2011, 12h25 #1 Chonchon3811 Marqueur de taille ------ Bonjour à tous! Lors d'un TP de biochimie je devais déterminer le masse moléculaire de protéines par électrophorèse. J'ai pour cela utilisé un marqueur de taille contenant 13 molécules. Mais j'ai un petit soucis, après révélation, seules 10 bandes apparaissent pour le marqueur de taille... Du coup je suis coincée car je ne vois pas comment identifier les bandes apparues et leur associer une masse moléculaire. Y a-t-il une astuce ou mes résultats sont-ils inexploitables? Merci à tous ----- 02/01/2011, 13h20 #2 Emilietoc Re: Marqueur de taille Bonjour, c'est assez classique avec les marqueurs de taille, pour les voir toutes il faut des gels à gradient. La solution c'est de se baser sur l'épaisseur des bandes, en général il y en a des plus importantes, ou alors l'agencement entre elle, il faut regarder sur la notice. 02/01/2011, 13h47 #3 Merci beaucoup pour le coup de main!
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Exemple de gel d'agarose de produits de PCR avec le marqueur de poids moléculaires connus sur la gauche Un marqueur de poids moléculaire est une solution de molécules d' ADN ou de protéines servant à déterminer le poids moléculaire de fragments d'ADN ou de protéine. Ils sont couramment utilisés dans les différents types d' électrophorèse (en gel d'agarose, gels SDS-PAGE …). Ce marqueur sert de référence pour estimer la taille (inconnue) des molécules d'intérêt. Les molécules présents dans le mélange utiliser, en général industriel, doit présenter des molécules de même nature que celle que l'on souhaite étudier (protéines, ADNdb, ADNsb.. ) et des tailles qui voisinent pour une part celle de la molécule étudiée. Marqueur de poids moléculaire nucléotidique [ modifier | modifier le code] Marqueur de poids moléculaire protéique [ modifier | modifier le code]
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Une autre source de différence peut venir du protocole: l'absence de béta-mercapto-éthanol (ou de DTT) dans le bleu de migration permettant de préserver les ponts disulfures, font que les 2 sous-unités d'une protéine restent attachées et migrent sous la forme d'une seule entité de grande taille. Cette différence peut tout simplement être due à une estimation imprécise due au marqueur de poids. En effet il faut avoir à l'esprit, qu'un marqueur pré-coloré est pratique mais reste imprécis. Il permet d'évaluer la taille de sa protéine d'un coup d'œil, mais ne permettra jamais d'évaluer précisément sa taille réelle. Une mesure précise doit être effectuée avec un marqueur non coloré. En effet les colorants qui sont greffés sur les protéines qui constituent le marqueur modifient leur taille et donc leur migration.
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Bon courage Fabien Discussions similaires Réponses: 3 Dernier message: 23/12/2008, 12h15 Réponses: 1 Dernier message: 03/11/2008, 08h47 Réponses: 4 Dernier message: 19/03/2008, 06h35 Réponses: 2 Dernier message: 23/11/2007, 15h54 Réponses: 1 Dernier message: 20/03/2006, 16h07 Fuseau horaire GMT +1. Il est actuellement 11h41.
LES MARQUEURS BIOCHIMIQUES ET MOLECULAIRES COMME MOYENS D'ETUDE DE LA DIVERSITE GENETIQUE. Les informations obtenues au niveau phénotypique sont souvent difficiles à interpréter, car, il s'agit de variations continues où de nombreux gènes peuvent y être impliqués. Les marqueurs génétiques de types protéique, enzymatique ou nucléiques, dont l'expression est indépendante de l'environnement peuvent être utilisés pour caractériser les populations et évaluer leur diversité génétique aux niveaux intra- et inter-populations. Un marqueur biochimique et moléculaire est une protéine ou une séquence de DNA facilement détectable et transmissible génétiquement. Il résulte d'un polymorphisme pouvant être utilisé dans l'étude de la diversité génétique. Recherche rapide dans site takween et sites liés de l'auteur: Liens utiles: Isoenzymes -- RFLP -- RAPD (PCR) -- AFLP -- Mesures de la diversité génétique -- externes: Isoenzymes-mutations: Isozymes. Principe de détection: Isozymes: loci, allèles: RFLP: RAPD: AFLP: SSR (microsatellites): Différents types de polymorphismes Polymorphisme des protéines.